肉的宰后嫩化最主要归因于肌原食物合成人造纤维组成特征的毁损，肌原食物合成人造纤维组成特征是由内源性核核血清质电离酶吸附肌原食物合成人造纤维和神经体癌体细胞核骨架核核血清质引发的。与数20年来时不时是重视原点的钙核核血清质酶各个，胱天核核血清质酶（caspases）附近作为感学习兴趣搞笑的话题。胱天核核血清质酶在神经体癌体细胞核凋亡的继续执行环节起着至关注重的角色，这其中caspase-3在去世核核血清质电离中的角色是甲乙双领域和复杂性的，往往值当进一大步的深入分析。S-亚硝基化根据调低钙移除、能量消耗排泄、核核血清质质吸附和神经体癌体细胞核凋亡来调低肉质地，还有嫩度和持水本事。先前的深入分析发掘S-亚硝基化可调低依赖性线粒体的caspase-3级联发生反应，这已经是肌群神经体癌体细胞核凋亡和鸡肉高质量不同的因为。caspase-3的的深入分析重点村是其与神经体癌体细胞核凋亡的关联，同时，没有有的深入分析浅谈S-亚硝基化调低caspase-3的体制。

2024年9月由武汉农产品加工大学时张万刚传授销售团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生态学为该研究提供了亚硝基化体现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

简体中文文章标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

中文核心期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2023年影响力指数公式：5.7

展现时期：2024年9月

企业客户企业：南京农业大学

调查建筑材料：蛋白

拜谱出具技术水平：亚硝基化修饰组学

系统自驾线路：

一、论述结局

01.Caspase-3活性酶

现尚不了解清楚NO对caspase-3的抑加工制帮助帮助是否能够归因于NO介导的S-亚硝基化，有所差异渗透压等度的GSNO作外源性NO供应商，以引导caspase-3的身体外S-亚硝基化。效果体现了，与是没有GSNO的组相对来说，100、200和400μM GSNO组的caspase-3抗逆性差异性削减（图1），与事先简讯保持一致。GSNO整理削减caspase-3抗逆性的未知原因仍存在不足相一致。

图1 差异渗透压的GSNO净化处理对caspase-3亲水性的直接影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化能力

探析Caspase-3的亚硝基化方面，以具体分析GSNO对Caspase-3的现象性。经GSNO清理后，检查到caspase-3蛋清S-亚硝基化抗弯强度新增（图2）。这类最终结果反映出，外源性GSNO培养出来可成就 引发caspase-3的身体S-亚硝基化。最让人诧异的是，在不留存GSNO留存的剖析组中检查到一名衰弱的S-亚硝基化带，这反映出caspase-3很有可能发生了内源性的S-亚硝基化。于此，本探析中caspase-3的S-亚硝基化方面较高，而caspase-3的生物减小，这与前几天的探析完全一致。但，caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化表达位点尚不很明白，还要求进几步的经历。

图2 GSNO治疗对caspase-3S-亚硝基化标准的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化装饰组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的回文编码序列。海蓝标出的回文编码序列透露S-亚硝基化肽，灰色标出的C透露S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3化学降解结核蛋白

结血清做为一些极为核心的组织内部骨架血清，在保持肌组织内部格局的格局删改性和收拢性因素起着极为核心用，研究探讨S-亚硝基化caspase-3对结血清光吸附的比较辨别力的还都具有极为核心必要性。与Std（未用胱天血清酶-3和GSNO孵育的初使肌植物棉纤维血清）组比起，0 μM GSNO组（肌原植物棉纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的删改结血清含碳量显眼变低，显示caspase-3对结血清还都具有暗藏的血清溶解性能。在GSNO孵育后，删改结血清的含碳量显眼增大（P < 0.05）。因此，当GSNO溶液浓度身高时，删改结血清的含碳量延续上涨（P < 0.05）（图5）。上述看见反映出，SNO呈现的caspase-3以横向依赖感的原则仰制结血清的光吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结蛋清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3溶解肌钙球蛋白-T

肌钙核蛋清-T (TnT)是原肌球核蛋清控制开展背部肌肉回缩的细条的需要肌原仟维核蛋清。TnT的光化学挥发功能是测量到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化前提条件下，caspase-3对TnT的光化学挥发情況如同6图示，与Std组（不含有caspase-3和GSNO的肌原仟维）相对比，caspase-3组中30 kDa TnT细节描写相关系数增高，体现了caspase-3直接参与了TnT的光化学挥发，显然，caspase-3与GSNO的孵育形成30 kDa TnT走低。在100和200 μM GSNO组当中不测量到很大的文化差异(P > 0.05)，而当GSNO的溶液浓度到400 μM 时，该细节描写相关系数增多(P < 0.05)。等找到体现了了SNO表达的caspase-3对TnT光化学挥发的抑自制用用处。结核蛋清和TnT是caspase-3的神经敏感底物，而GSNO除理降caspase-3的几丁质酶或者形成肌原仟维核蛋清光化学挥发限度降。以上指出，NO诱导型的S-亚硝基化能否实现表达半胱氨酸残基来控制caspase-3的几丁质酶，于是进几步反应其对结核蛋清和TnT的核蛋清油脂水解工作能力，进而反应鸡肉品质质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人心得体会

本研究分析目的探析S-亚硝基化对caspase-3体现的应响还有继而对羊肉肌原玻璃人造纤维身体外生物降解的应响。核血清S-亚硝基化也可以体现caspase-3的半胱氨酸残基，才能致使caspase-3生物降低了，进三步限制了其对羊肉肌原玻璃人造纤维核血清的核血清电离专业能力。

三、拜谱个人心得体会

阐述选取了酶活测得，亚硝基化绘制语组学阐述，WB等查测法律手段，察觉血清S-亚硝基化都可以绘制语caspase-3的半胱氨酸残基，这促使了caspase-3化学活化的下降，齐头并进步骤抑制作用了其对鸡肉肌原氯纶血清的血清核苷酸质水解程度。本阐述为理解血清质亚硝基化对肉肥的调空缘由供应一个多个新的焦距。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的核营养物质组学、修饰语核营养物质组学、消化吸收组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸品牌系列品牌，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺硝化作用、total防氧化恢复备份、游离态巯基，欢迎大家咨询！

参考使用文献综述：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663