单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于抗体阳性种类特喜欢的人、寡核苷酸掩盖总成本比较高或运营方法僵化。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯讲解队伍在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低的成本、跨动物群、全平台网站兼容的全新解决方案。

中文核心期刊详细资料

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国专业院基因隐性基因规律的与成长菌物学科研所和国基因隐性基因规律的学精主办人的全球学术讨论界学术讨论刊物，努力于媒体报道寿命专业和医药学基因隐性基因规律的学区域的亚无性科研重大成果。JGG 202几年度印象系数7.1，Scopus学术讨论界学术讨论刊物评述统计指标CiteScore 9.9，排名第JCR 202几年度GENETICS & HEREDITY区域Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY区域Q1区，排名第国专业院学术讨论刊物区分菌物学类别1区(Top学术讨论刊物)，基因隐性基因规律的学和生物制品化与分子式菌物学小类双1区。

BIOPROFILE

啥子是HEATag

巧用的“二三合一”设计

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组成部分的凝固核蛋白

「市场定位器」引擎 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化淡化（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「连结器」控制模块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）检索条状码去共价接入。

“1+1>2”的治疗效果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行样板标记图片与溯源系统。

Fig1: HEATag多方面标签工作原理提示图

BIOPROFILE

初级教程开展

HEATag又有点能打？

可不可以在多种的条件下，变现母乳喂奶动物界体细胞系系单体细胞系混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。理论研究创业团队为 HEATag 设施了多轮 “负荷测式”，从细胞质膜系到细胞质膜核，从常溫到温度，从新鲜范本到规定范本，全多方面查验它的安稳性和是真的吗性。

第二轮测试仪对哺乳期间软体动物内部系：科研者抉择了根据人、鼠、仓鼠3个种群的两种内部（HEK293T、K562、MEF、CHO），在温度使用 HEATag 标示后结合测序。然后再利用的 11447 个内部中，85.66% 都能能够 HEATag 条型码更准确相配到原种群，子样本间交叉的情况影响极低，UMAP 聚类讲解讲解往往之间证件，HEATag 条型码与种群特女性朋友基因组组功能宽度同步。 没过多久，测试英文因素进一步推动一个脚印升級：研究分析人成功在 4℃下记号刚采神经元、在制冷下记号甲醇固定不动的神经元，和直观记号神经元核。导致显示依旧出众：所有因素下，模板标签贴与动物群短信均具更好的有关系性，分割准确的率超 95%。若果甲醇固定不动的会导至严重的转录本交叉重合环保问题，神经元核制法能有多量 RNA 外流，神经元型号的标注导致显示依旧与刚采模板控制不对，介绍信 HEATag 能够记号不一样的除理因素下的实验报告模板。

Fig2: HEATag 可在不同的具体条件下成功单细胞系转录组混样研究

能够图标哺乳期间软体动植物和海上无脊柱软体动植物的原代细胞系

若说癌人体细胞系测试英文是 “基础条件题”，那安排样品也是 “额外增加题”， 以下样品恰恰恰因癌人体细胞型冗杂、区域环境融入性特殊的，变成了标志技术水平的 “薄弱点”，而 HEATag 恰恰恰在以下 “薄弱点” 上凸显了优点。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸结构，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不只能被准确无误分辨，整个包括细胞膜类型的的聚类算法最后都明白可辨。

更令人惊喜的是HEATag对海上怪物的支持性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长条型码与动物群转录组兼有较高不符性，如果没有显示因高盐场景以至于的 “符号出现异常”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可保持蒲乳期爬行动物机构样品丰富 scRNA-seq 讲解

Fig4: HEATag可实行鲜新海底无脊柱软体动物多大 scRNA-seq 探讨

HEATag与癌细胞的融入是不会促使转录组的有明显变动

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在完整标记图片人物的一同，没对后期的转录多组分析产生扰乱，有保障了学习数剧的真实可靠性。

Fig5: HEATag不是反应子样本的 RNA 表现经营模式

BIOPROFILE

中国回首过往

HEATag 能为单细胞系研究分析所带来什么呢？

HEATag 的價值，远以上于 “搞定符号难题”，它的灵活力高性和普遍意义，请稍等为单神经元探索开启越多也许 性

从应该用的场景看来

HEATag 能覆盖面从 “简单的比了解”（如癌集体机构大力开展与一切正常集体机构大力开展、药品处理与参考）到 “大数量设计”（如集体机构大力开展人体细胞核图谱生成、高通骁龙量各种需求）的全比率各种需求。跟随 PIP-seq、Stereo-cell 等新型产品可扩充技巧的趋势，HEATag 还能进一次上升单人体细胞核设计的通量，力助成果转化的团队大力开展更好数量的好项目。

从跨领域行业前景来讲

HEATag 往往适用人群于转录组学，还能与表观人类基因组学、血清质组学、区域空间组学等技木结合起来，按照订制检索和寡核苷酸编码序列，HEATag 可不可以更快带入有差异 的组学方案，不直接影响无线信号截获进一步。还，根据HEATag还可不可以成长单体细胞糖组学调查技木。

BIOPROFILE

媒体合作信息

拜谱菌物与陈凯博士生导师达到第一次公司合作意项

值当关注新闻的是，在 HEATag 方法设备突显出惊人操作发展空间的蓝本下，拜谱生态学已与男方浮游生物体生物体技术科学实验英文性与建设项目浙江实验英文性室（深圳）陈凯讲解实现目标逐项合作关系有意向。两方策划着眼于 HEATag 方法设备的企业化执行、教学研发管理图片转换等方向盘进行角度操作，推动了一种低料工费、跨植物物种的单生殖血肿瘤细胞符号方法设备最快的速度操作于实际上的教学研发管理消费场景，为更好地实验英文性室能提供高效率、经济发展的单生殖血肿瘤细胞钻研APP，动力教学研发管理事业者在生殖血肿瘤细胞生态学学、浮游生物体生物体技术生态学学、疾患共识机制等领域拿得更好地冲破